Caracteriza����o de beta-lactamases de espectro ampliado (ESBLs), genes de resist��ncia aos antimicrobianos e conte��do plasmidial em cepas de Escherichia coli e Salmonella spp. n��o tif��ides isoladas do ambiente hospitalar e da comunidade

Enterobact��rias produtoras de ESBLs s��o descritas tanto no ambiente hospitalar quanto na comunidade em todo o mundo. No Brasil, esses microrganismos tamb��m t��m emergido como uma causa importante de infec����es, sendo as enzimas CTX-M as prevalentes. O objetivo deste estudo foi analisar diferentes aspectos genot��picos relacionados �� express��o da resist��ncia aos antimicrobianos em cepas Escherichia coli e de Salmonella spp, tais como: a diversidade de ESBLs, os genes de resist��ncia aos antimicrobianos e o conte��do plasmidial. Os aspectos epidemiol��gicos das cepas produtoras de ESBLs tamb��m foram investigados. Foram estudadas 88 cepas de enterobact��rias, sendo 43 E. coli e 45 cepas de Salmonella spp., de origem hospitalar e da comunidade (principalmente alimentos), isoladas na cidade do Rio de Janeiro. A express��o de ESBL foi observada em sete cepas de E. coli (7/43, 16,3%) e em uma cepa de Salmonella Typhimurium (1/45, 2,3%) e as enzimas foram identificadas como variantes de CTX-M e SHV-5, respectivamente. Entre as cepas de E. coli, a enzima CTX-M-2 foi a mais frequente (n = 4), sendo detectada em cepas isoladas de swab retal de pacientes hospitalizados, enquanto as enzimas CTX-M-59 (uma variante de CTX-M) (n = 1) e CTX-M-9 (n = 2) foram identificadas em cepas isoladas a partir de esp��cimes cl��nicos. Salmonella Typhimurium produtora de SHV-5 foi isolada do ambiente hospitalar (f��rmula infantil). As cepas de E. coli produtoras das enzimas CTX-M pertenceram a grupos filogen��ticos (A, B1, D) e STs (ST34, ST69, ST101) diferentes, sendo os genes blaCTX-M identificados em plasm��deos com tipo de replicon IncA/C de cerca de 150 kb (blaCTX-M-2, blaCTX-M-9, blaCTX-M-59) ou 80 kb (blaCTX-M-2). A cepa de S. Typhimurium produtora de SHV-5 pertenceu a um ��nico clone (A-ST19) e o gene blaSHV-5 foi identificado em plasm��deo com o replicon IncL/M com aproximadamente 55Kb. Foi identificado pela primeira vez no Brasil o ST313 em um clone de S. Typhimurium (D-ST313), comumente associado com doen��as invasivas severas, particulamente no continente africano. Genes que codificam para a resist��ncia aos antimicrobianos n��o-beta-lact��micos e integrons classe 1 foram identificados entre as cepas de E. coli e de Salmonella spp. multirresistentes produtoras ou n��o de ESBLs. Em conclus��o: i) nossos resultados referentes �� E. coli confirmaram a dissemina����o de enzimas CTX-M (principalmente variantes do grupo CTX-M-2) desde, pelo menos, o ano de 2000, em hospitais no Rio de Janeiro; demonstraram a implica����o dos plasm��deos IncA/C na dissemina����o de genes blaCTX-M; indicaram a poss��vel evolu����o intra-plasm��deo de blaCTX-M-59 a partir de blaCTX-M-2; a observa����o da diversidade e multiplicidade de plasm��deos poderiam fornecer plataformas gen��ticas para a dispers��o de diferentes genes e/ou elementos de resist��ncia aos antimicrobianos; ii) em rela����o �� Salmonella spp. este estudo descreveu, pela primeira vez, o isolamento, a partir de f��rmula infantil, de uma cepa de S. Typhimurium produtora de ESBL; foi demonstrada a associa����o do gene blaSHV-5 com plasm��deo do tipo IncL/M, que �� considerado epid��mico; foi identificado o clone D-ST313 de S. Typhimurium, que est�� associado a doen��as invasivas severas no continente africano, que reuniu cepas isoladas exclusivamente do ambiente hospitalar.

Estudo da atividade anti-inflamat��ria e toxicol��gica em extratos de corais do g��nero Tubastraea

O ambiente marinho �� um dos ecossistemas mais diversos e complexos em termos de biodiversidade. As condi����es qu��micas, f��sicas e biol��gicas desse ambiente favorecem a produ����o de uma variedade de subst��ncias pela biota, transformando os produtos naturais marinhos em um dos recursos promissores na pesquisa por novos compostos bioativos. O g��nero Tubastraea (Scleractinia, Dendrophylliidae) inclui corais ahermat��picos que produzem compostos secund��rios bioativos em situa����es de competi����o. No estado do Rio de Janeiro s��o encontradas duas esp��cies invasoras desse g��nero, Tubastraea coccinea e Tubastraea tagusensis. A primeira �� amplamente distribu��da nas ��guas tropicais do Atl��ntico e do Pac��fico, e a segunda �� nativa do leste do pac��fico, ambas invasoras no Atl��ntico Sul. Este trabalho objetiva avaliar as atividades anti-inflamat��ria, antioxidante e toxicol��gica de extratos metan��licos de T. coccinea e T. tagusensis. As col��nias de Tubastraea foram coletadas na Ba��a de Ilha Grande, Rio de Janeiro - Brasil e extra��das com metanol. A caracteriza����o qu��mica foi realizada atrav��s da espectroscopia ultravioleta, vis��vel e de infravermelho. A����o anti-inflamat��ria foi avaliada pelo modelo in vivo de edema em pata de camundongo induzido por carragenina. Atividade sequestrante de radicais livres foi avaliada pelo m��todo do DPPH. Na avalia����o toxicol��gica utilizamos o ensaio Salmonella/microssoma, na presen��a e aus��ncia de ativa����o metab��lica ex��gena, o teste in vitro de micron��cleo com c��lulas de macr��fagos de rato e o teste de mortalidade com o microcrust��ceo Artemia salina. Foi poss��vel a distin����o dos grupos qu��micos presentes nos extratos, com os resultados encontrados sendo corroborados com os presentes na literatura. Os extratos de ambas as esp��cies apresentaram inibi����o significativa no edema da pata nas doses testadas, em rela����o ao ve��culo. Ambos os extratos demonstraram capacidade pela captura do radical DPPH. Atividades citot��xica e mutag��nica na aus��ncia de metaboliza����o ex��gena n��o foram observadas para as linhagens TA97, TA98 e TA102 nas duas esp��cies; para a TA100 o extrato de T. coccinea induziu citotoxidade na concentra����o de 50 g/placa. Os dois extratos induziram citotoxicidade na presen��a de metaboliza����o ex��gena para a cepa TA98, tendo sido detectada tamb��m indu����o de mutagenicidade nesta linhagem para T. coccinea. Os extratos n��o foram capazes de induzir a forma����o de micron��cleos e n��o foram t��xicos para o microcrust��ceo A. salina. A resposta inibit��ria do edema ap��s 2 h da indu����o indica que os compostos presentes nos extratos atuam na segunda fase da inflama����o, possivelmente pela inibi����o da produ����o de prostaglandinas. Os resultados sugerem que os extratos das esp��cies T. coccinea e T. tagusensis apresentam subst��ncias com potencial uso farmacol��gico, como agente anti-inflamat��rio e antioxidante.

Efeitos da ingest��o materna de sorbitol na lacta����o sobre o perfil nutricional, bioqu��mico e toxicol��gico das proles amamentadas

Sorbitol �� um poliol encontrado em produtos para fins especiais, como diet e light, Dentro deste contexto, incluem-se as lactantes como grandes consumidoras, almejando o retorno mais r��pido ao peso pr��-gestacional. Devido �� grande car��ncia em dados referentes ��s consequ��ncias metab��licas do consumo excessivo destes tipos de produtos, o objetivo deste trabalho foi avaliar os poss��veis efeitos da ingest��o materna de sorbitol na lacta����o sobre os perfis nutricional, bioqu��mico e toxicol��gico nas proles amamentadas. O teste da Salmonella/microssoma foi utilizado, inicialmente, na avalia����o mutag��nica e citot��xica com linhagens de S. enterica sorovar Typhimurium (TA97, TA98, TA100, TA102, TA104 e TA1535). Verificamos a capacidade de revers��o da muta����o (I.M.) e sobreviv��ncia (%), em diferentes concentra����es (0,4; 4; 40; 400; 4000 e 5000 μg/placa). Os resultados foram considerados positivos para valores de I.M. ≥ 2,0. Ratas wistar lactantes (6 por grupo experimental), cada uma com 6 filhotes, receberam sorbitol (0,00015 mg/g/dia; 0,0015 mg/g/dia e 0,15 mg/g/dia), nos primeiros 14 dias da lacta����o. Neste per��odo, avaliamos a biometria das m��es e proles, consumo de ra����o e ingest��o h��drica das m��es. Ap��s a lacta����o, as ratas m��es foram ordenhadas, e, junto com as proles, sacrificadas por pun����o card��aca, para coleta de sangue total. Os f��gados das proles foram submetidos ao m��todo de perfus��o, para obten����o de hepat��citos em cultura prim��ria, ao final dos 14 dias de lacta����o. Os f��mures das proles foram retirados, para obten����o da medula ��ssea. A bioqu��mica de sangue das proles (glicose, triglicer��deo, colesterol total, LDL, prote��nas totais, albumina, ALT, AST, c��lcio total e ionizado) foi analisada, assim como a bioqu��mica do leite ordenhado (triglicer��deos). Os testes do micron��cleo em medual ��ssea e hepat��citos, assim como o teste Cometa em sangue total, foram utilizados para avalia����o genot��xica e citot��xica, de acordo com as diretrizes da OECD. Os resultados mostraram que, em concentra����es mais baixas (0,00015 e 0,0015 mg/g), o sorbitol induziu o ganho de peso, principalmente na menor concentra����o (0,00015 mg/g), e altera����es no perfil lip��dico do sangue em todas as concentra����es. As quantidades de triglicer��deo no leite variaram em fun����o da dose ingerida, reduzida na maior concentra����o (0,15 mg/g) e aumentada na menor (0,00015 mg/g). A maior concentra����o (0,15 mg/g) resultou em perda de peso das m��es e proles, diminui����o de prote��nas viscerais totais, albumina e aumento de enzimas hep��ticas (ALT e AST) nas proles. Os resultados do teste da Salmonella/microssoma n��o indicaram mutagenicidade, entretanto, uma rela����o de depend��ncia entre dose e ��ndice de Mutagenicidade (I.M.). Ambos os testes, micron��cleos de medula ��ssea e hepat��citos, apresentaram uma citotoxicidade dose dependente, estatisticamente significativa em rela����o ao grupo controle, corroborando com a genotoxicidade do teste Cometa e depend��ncia de dose encontrada no teste da Salmonella/microssoma. Em concentra����es mais baixas, parece existir modula����o das vias lipog��nicas, em contrapartida, nas mais altas a toxicidade parece dificultar tais altera����es, induzindo o efeito contr��rio. Concluimos que o consumo excessivo de sorbitol resulta em altera����es metab��licas e toxicol��gicas em lactentes, mesmo sendo considerado seguro pelo FDA e ANVISA.

Marcadores fenot��picos e genot��picos de resist��ncia aos antimicrobianos em enterobact��rias e Staphylococcus spp. e detec����o de genes para a produ����o de enterotoxina estafiloc��cica em cepas isoladas de equipamentos da cozinha de um hospital universit��rio no munic��pio do Rio de Janeiro

A resist��ncia aos antimicrobianos pela produ����o de β-lactamases em enterobact��rias �� um problema adicional neste cen��rio. Staphylococcus spp �� considerado um pat��geno humano freq��entemente associado a infec����es adquiridas no ambiente hospitalar. O objetivo desse trabalho foi estudar a resist��ncia aos antimicrobianos em cepas de Enterobact��rias e Staphylococcus spp. isoladas de equipamentos utilizados no preparo de dietas destinadas �� pacientes internados em um hospital universit��rio no munic��pio do Rio de Janeiro, al��m de verificar a presen��a de genes codificadores de enterotoxinas nas cepas de Staphylococcus spp. As enterobact��rias e os Staphylococcus spp. foram isolados e identificados por metodologia convencional. Para o teste de susceptibilidade aos antimicrobianos foram utilizados discos contendo antimicrobianos clinicamente relevantes. Foi determinada a concentra����o inibit��ria m��nima (CIM) pela t��cnica de microdilui����o em caldo para os antimicrobianos clinicamente relevantes. A pesquisa de genes que codificam β-lactamases em enterobact��rias foi realizada pela t��cnica de rea����o em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento para os genes blaTEM, blaSHV, blaCTX-M, blaOXA-1 e blaCMY-2. Para Staphylococcus spp. foram pesquisados, atrav��s da PCR e sequenciamento, os genes de resist��ncia a meticilina, gentamicina e eritromicina e os genes codificadores de enterotoxinas (sea-see, seg-sej, sen-ser e seu). Foram isoladas 97 cepas de enterobact��rias, 40 de liquidificador e 57 de batedeira e 40 cepas de Staphylococcus spp., 20 de cada equipamento. Dentre as enterobact��rias, o g��nero Enterobacter foi isolado com maior frequencia (n=37, 38%). Foram ainda isoladas seis cepas de Salmonella spp. Das enterobact��rias, 80% (n=79) foram resistentes a pelo menos um antimicrobiano e 38% (n=37) a tr��s ou mais. A express��o fenot��pica presuntiva de b-lactamases do tipo AmpC foi detectada em 32 cepas. O gene blaCMY-2 n��o foi encontrado. Doze cepas apresentaram halos de inibi����o com screaning positivo para a pesquisa de ESBL. Foi detectada a presen��a do gene blaSHV em K. pneumoniae subsp. pneumoniae. O sequenciamento desse gene permitiu identific��-lo como sendo blaSHV-36. Dentre os Staphylococcus spp., oito foram identificados como coagulase-positivas (SCP) e 32 como coagulase-negativas (SCN). As oito cepas de SCP foram identificadas como S. aureus subsp. aureus. Dentre os SCN, as esp��cies identificadas com maior frequ��ncia foram: S. caprae (n=7, 17,5%), S. simulans (n=5, 12,5%) e S. epidermidis (n=4, 10%). Destas, 83% (n=33) foram resistentes a pelo menos um antimicrobiano e 30% (n=12) foram resistentes a mais do que tr��s. Duas cepas (5%) de S. epidermidis apresentaram perfil de resist��ncia a at�� seis antimicrobianos e genes de resist��ncia a meticilina, a eritromicina e a gentamicina. Todas as sete cepas que foram resistentes no TSA e na CIM a gentamicina, apresentaram o gene aac(2)/aph(6). O gene ermB foi observado ainda em uma S hominis subsp hominis que apresentou resist��ncia na CIM e no TSA. Foi detectada a presen��a de pelo menos um gene codificador de enteroxotxina em 83% (n=33) das cepas. O gene seg foi detectado em 11 cepas, o gene sei em 17 cepas e o gene sen em 31 cepas. Os resultados encontrados implicam as dietas preparadas com esses equipamentos como ve��culo de dissemina����o de enteropat��genos e Staphylococcus spp. com marcadores de resist��ncia e genes codificadores de enterotoxinas relevantes no ambiente hospitalar.

Avalia����o de sistema de cultivo integrado, a partir da reciclagem de ��guas residuais submetidas a tratamento prim��rio: pesquisa de esp��cies dos g��neros Salmonella, Shigella, Vibrio e Aeromonas

Para avaliar um sistema integrado de aquicultura foram realizadas an��lises microbiol��gicas da ��gua utilizada neste sistema e determinada a incid��ncia e resist��ncia antimicrobiana dos enteropat��genos no ecossistema relacionado. As amostras de ��gua testadas apresentaram 32,9% de taxas de coliformes fecais (≤1.600/100mL), de acordo com a OMS para piscicultura em ��guas residuais. Salmonella spp. foram detectadas em 14,5% das amostras. De um total de 33 cepas, 15,1% eram resistentes a um ou dois antimicrobianos testados e resist��ncia a m��ltiplas drogas n��o foi observada. Aeromonas spp. foram identificadas em 91,6% das amostras. De um total de 416 cepas, resist��ncia a uma classe de antimicrobianos foi observada em 66,3% e a multirresist��ncia ��s drogas em 37,7%. Na avalia����o da virul��ncia dos isolados de Aeromonas hydrophila, 85,3% das cepas apresentaram Beta-hem��lise nos tr��s diferentes tipos de eritr��citos empregados e 99,1% nos eritr��citos de coelho e cavalo, sendo poss��vel a caracteriza����o atrav��s da PCR do gene aerA e lip, em 100% das amostras. Os resultados obtidos apontam para a relev��ncia quanto ��s vantagens da implementa����o de um sistema integrado, disponibilizando alimentos com custo reduzido, por��m este sistema necessita de um controle r��gido e efetivo para que estes produtos n��o constituam ve��culos para a dissemina����o de doen��as.

Avalia����o da suscetibilidade antimicrobiana e do perfil de macrorrestri����o do DNA de isolados humanos de Salmonella serovar Typhimurium fagotipo 193, no per��odo de 1970 a 2008

Para analisar cepas de Salmonella ser. Typhimurium isoladas de processos ent��ricos e extraintestinais humanos ocorridos no per��odo de 1970 a 2008 de diferentes regi��es do pa��s foram selecionadas, com base nos registros contidos no banco de dados do Laborat��rio de Enterobact��rias do IOC/FIOCRUZ, RJ, amostras do fagotipo prevalente 193, visando precipuamente o reconhecimento de clones epid��micos. Foram selecionadas 553 cepas de Salmonella ser. Typhimurium fagotipo 193 representadas por 91, 65, 70 e 327 amostras referentes as d��cadas de 70, 80, 90 e ao per��odo de 2000 a 2008, respectivamente. Na an��lise global da sensibilidade destas cepas, 52% apresentaram um ou mais marcadores de resist��ncia a antibi��ticos inclu��dos no perfil ACSSuT. Este perfil de resist��ncia completo foi verificado em 20,9% dos isolados, sendo os 21,9% restantes, sens��veis a todas as drogas testadas, especialmente no per��odo de 2000 a 2008, representadas por 121 amostras (37,0%) em rela����o as 327 culturas dessa ��poca. O maior percentual de resist��ncia foi observado nas amostras da d��cada de 70 (99%) sendo o perfil ACSSuT detectado em 35,2% dos isolados, ressaltando-se que todas as amostras foram isoladas de processos gastroent��ricos ocorridos na cidade de S��o Paulo. Ao longo das quatro d��cadas de estudo, descreve-se um ponto de ruptura entre a preval��ncia de resist��ncia e a suscetibilidade na transi����o entre as d��cadas de 80 e 90. Embora o n��mero de isolados de Salmonella ser. Typhimurium fagotipo 193 tenha aumentado no ��ltimo per��odo considerado, o percentual de mono e multirresist��ncia aos antimicrobianos se situou em n��vel elevado (63,0%). A an��lise do polimorfismo obtido ap��s macrorrestri����o com a enzima XbaI revelou que cepas isoladas na d��cada de 90 apresentaram elevado percentual de similaridade (≥85%) com cepas isoladas recentemente (per��odo de 2000-2008), sendo agrupadas nos mesmos subclusters. Por outro lado, as cepas da d��cada de 70 inserem-se em subclusters independentes, embora o percentual de similaridade entre tais subclusters e os demais seja ≥70%; o mesmo sendo observado para as cepas isoladas durante a d��cada de 80. Em conclus��o, este estudo mostrou que a preval��ncia de isolados humanos de Salmonella ser. Typhimurium fagotipo 193 no Brasil vem progredindo desde a d��cada de 1990, enquanto a detec����o do modelo R (ACSSuT) est�� diminuindo e a avalia����o atrav��s da PFGE indicou a presen��a de multiplicidade de perfis de macrorrestri����o no fagotipo 193, entretanto com elevados percentuais de similaridade entre si, sugerindo alguma clonalidade, tendo em vista o per��odo entre o isolamento e a an��lise

Mutag��nese ambiental: estabelecimento de valores de refer��ncia para manguezais da Ba��a de Ilha Grande

Estudos ambientais t��m demonstrado que subst��ncias geradas por processos antropog��nicos podem causar efeitos prejudiciais interferindo no equil��brio natural do ecossistema. Manguezais exercem fun����es essenciais nos ciclos biol��gicos e constituem ��rea de Prote����o Permanente no Brasil. Infelizmente, eles est��o sendo degradados acima do seu limite de suporte, levando a uma redu����o das ��reas remanescentes no mundo. Este trabalho apresenta os resultados de mutagenicidade e genotoxicidade observados em quatro amostragens (PI, V, O e PII) entre 2009 e 2010, relacionados com metais e hidrocarbonetos polic��clicos arom��ticos (HPA) em sedimento de mangue para a caracteriza����o dos valores de refer��ncia. Os testes de genotoxicidade foram feitos a partir de hem��citos do caranguejo Goniopsis cruentata, coletados em um ecossistema potencialmente n��o polu��do do Brasil, localizado no sul do Rio de Janeiro (Parati/RJ), chamado de "Saco do Mamangu��". Coleta, armazenamento e manipula����o dos sedimentos e material biol��gico de cinco pontos de amostragem (M1- M5) foram processados de acordo com normas norte-americanas reconhecidas. A identifica����o das subst��ncias qu��micas foi realizada com extratos de sedimentos e utilizada no bioensaio Salmonella/microssoma (Kado). A avalia����o de potenciais danos genot��xicos estabelecidos foi realizada atrav��s do Teste de Micron��cleo, que apresentou valores significativos na amostra V. Resultados negativos foram observados para as cepas de Salmonella typhimurium TA97, TA98, TA100 e TA102, tanto na aus��ncia quanto na presen��a de fra����o de metaboliza����o ex��gena de mam��feros (S9 mix 4%) em todas as an��lises. A quantifica����o por cromatografia gasosa com detec����o por espectrometria de massas dos 16 HPA priorit��rios em termos de conserva����o ambiental apresentou valores baixos nas duas primeiras amostragens (PI e V) e nulos nas coletas seguintes (O e PII), nos mesmos pontos. De acordo com os valores utilizados nos Estados Unidos e Canad�� como refer��ncia, os detectados por n��s n��o s��o considerados como toxicantes ambientais positivos, com exce����o do Benzo(a)pireno, que em M1V apresentou valores um pouco acima do limite a partir do qual j�� podem ser observados pequenos efeitos na biota. A an��lise dos metais (Cd, Cr, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb e Zn) por Espectrometria de Absor����o At��mica inicialmente realizada com a ��gua intersticial foi melhor interpretada a partir da matriz sedimento. Este estudo contribuir�� com a implementa����o de indicadores para valores de refer��ncia em mangue.

Exposi����o ao material particulado 2,5 m coletado em vias de alto tr��fego da cidade do Rio de Janeiro: avalia����o mutag��nica, genot��xica e determina����o de risco �� sa��de induzido por hidrocarbonetos polic��clicos arom��ticos

A mutagenicidade do material particulado �� atribu��da primeiramente aos hidrocarbonetos polic��clicos arom��ticos (HPA). Investigamos a atividade mutag��nica do material particulado (MP2,5) em amostras coletadas em tr��s pontos da cidade do Rio de Janeiro. As coletas foram realizadas com aux��lio de um amostrador de grande volume na Avenida Brasil, no campus da Universidade do Estado do Rio de Janeiro e no T��nel Rebou��as em filtros de fibra de vidro. Metade de cada filtro foi submetido �� extra����o por sonica����o com o solvente diclorometano. Seis HPA foram identificados e quantificados por cromatografia gasosa com espectrometria de massa (GC/MS). Ap��s a an��lise qu��mica as concentra����es dos HPA obtidos foram correlacionados ao fatores f��sicos, al��m de ser realizado avalia����o de risco para cada HPA estudado. Linhagens de Salmonella typhimurium (TA98 e derivadas TA98/1.8-DNP6, YG1021 e YG1024) foram utilizadas no ensaio de mutagenicidade e tratadas (10-50 g/placa) com extrato org��nico na presen��a e na aus��ncia de metaboliza����o ex��gena. C��lulas de raiz de cebola foram tratadas com extratos org��nicos nas concentra����es (5-25g/mL). A alta umidade encontrada no T��nel Rebou��as pode ter influenciado na deposi����o de cinco dos seis HPA estudados em material particulado. Al��m disso, em diferentes condi����es de tr��fego, motoristas de ��nibus que cruzam a Avenida Brasil e o Rebou��as t��nel est��o expostos ao risco induzidos por HPA na ordem de 10-6. Mutagenicidade foi detectada tanto na presen��a quanto na aus��ncia de metaboliza����o, para as linhagens YG1021 e YG1024 nos tr��s pontos, sugerindo a presen��a de nitro e amino derivados de HPA. As amostras do T��nel Rebou��as apresentaram os maiores valores para rev/g e rev/m3. Estes resultados podem estar relacionados ao longo trajeto e a restrita ventila����o. Efeito citot��xico foi detectado pelo ensaio Allium cepa nos tr��s pontos de monitoramento. Al��m disso os extratos org��nicos provenientes das coletas da Avenida Brasil, UERJ e do T��nel Rebou��as induziram efeito clastog��nico em c��lulas de raiz de Allium cepa

Paix��es e afetos: possibilidades de leitura das teses da Faculdade de Medicina do Rio de Janeiro no s��culo XIX

Este trabalho busca investigar as condi����es de produ����o dos saberes psicol��gicos contidos nas teses de doutoramento da Faculdade de Medicina do Rio de Janeiro no s��culo XIX. Tal meta visa, a partir de conceitos diversos, obter os princ��pios norteadores das obras dos futuros doutores, tomando como ponto de partida o seu contexto s��cio-cultural. Dois conceitos, no entanto, ser��o privilegiados: os de paix��o e afeto. Estes s��o conceitos que surgem em diversas teses, principalmente naquelas da primeira metade do s��ulo XIX per��odo da maior parte das teses selecionadas nesta ocasi��o. Uma das principais quest��es levantadas diz respeito �� maneira como os autores das teses elaboram seus trabalhos: utilizam-se das mais diversas refer��ncias para que possam corroborar aquilo que prop��em em seus trabalhos. Assim, freq��entemente recorrem a textos de autores consagrados mesmo que, por vezes, n��o haja concord��ncia entre os autores escolhidos. Os conte��dos utilizados s��o d��spares, mas, como s��o aparentemente concordantes com o que os m��dicos produzem, s��o apropriados por estes. Esta apropria����o vem a ser discutida a partir do trabalho de Michel de Certeau. Tamb��m vemos alguns elementos das teses sofrerem transforma����es, num trabalho de bricolagem, tal como prop��e Claude L��vi-Strauss. �� ineg��vel que a apropria����o e a bricolagem v��o al��m do que se verifica nas obras de Certeau e L��vi-Strauss: estes se referem �� cultura popular quando tratam daqueles temas, mas ao fazer uma incurs��o pelos escritos das teses, pode-se perceber que os mesmos fen��menos s��o caracter��sticos tamb��m de materiais que est��o al��m do que geralmente se chama de cultura popular, haja vista que teses de medicina n��o poderiam ser interpretadas como tal. Sendo o per��odo pesquisado uma ��poca em que a psicologia ainda n��o se constituiu como ci��ncia, os trabalhos m��dicos tornam-se instrumentos privilegiados de difus��o de saberes psicol��gicos. Fazem parte de um material que impulsiona a produ����o de conhecimento sobre o homem em seus aspectos individuais, culturais, sociais, psicol��gicos, indo al��m das discuss��es fisiol��gicas e org��nicas. Embora estas estejam presentes, formam um conjunto com o qual os autores das teses buscam verificar as vicissitudes humanas. Para realizar este estudo foi necess��ria uma pesquisa documental, onde as teses servem como fontes prim��rias para a execu����o do trabalho. Atrav��s da an��lise dos temas e termos constantes das teses, pretende-se constituir um mapa sobre o qual torna-se poss��vel articular as id��ias veiculadas nas teses com o contexto s��cio-cultural em que s��o produzidos os materiais dos escritos dos m��dicos

A Pesquisa acad��mica sobre A����o afirmativa no Brasil: um estudo conceitual das teses e disserta����es no per��odo entre 1.987 e 2.010

Este trabalho tem como objeto a an��lise conceitual da produ����o acad��mica de teses e disserta����es sobre o tema A����es Afirmativas (AAs) no Brasil, no per��odo compreendido entre 1987 e 2010. A abordagem metodol��gica utilizada foi pautada na pesquisa qualitativa de natureza bibliogr��fica. A principal fonte de dados foi o Banco de Teses e Disserta����es da Capes/MEC. A escolha da amostra, composta de 206 textos acad��micos, se deu com base na utiliza����o do termo a����o afirmativa como categoria de busca. Dessas amostras, foram analisados, por meio de mapas conceituais, 35 trabalhos completos, de modo a atender ao crit��rio de proporcionalidade entre o tema AAs e as demais categorias que emergiram da an��lise do corpo de dados com utiliza����o software Atlas.ti. Incialmente foi realizada a leitura cr��tica e a sele����o de categorias pertinentes ao tema, posteriormente utilizou-se o software para confirmar e/ou desconfirmar essas categorias. Com esse procedimento foi poss��vel n��o somente extrair o foco dado por cada trabalho acad��mico, como a abordagem te��rica, a metodol��gica, a posi����o dos autores em rela����o ao tema AAs, a popula����o alvo eleita por cada autor, como tamb��m identificar os autores/te��ricos recorrentes ao tema AAs utilizados para fundamentar esses trabalhos. Para demonstrar os resultados optou-se pela an��lise dos mapas conceituais de modo descritivo e ainda por apresent��-los no ap��ndice II de modo ilustrativo. Como resultado identificou-se que a grande maioria dos trabalhos refere-se as AAs a partir da aplica����o de pol��ticas p��blicas de redu����o das desigualdades, como o sistema de cotas relacionado ao acesso da popula����o negra no sistema de ensino superior. Quanto ao posicionamento dos autores em rela����o a essas a����es, foram raros os trabalhos que se posicionaram contra as AAs. De modo geral, os autores estudados entendem que esta �� uma forma de justi��a distributiva e de repara����o social das desigualdades entre diferentes segmentos e grupos sociais. Considera-se que este estudo se faz importante na medida em que �� crescente no ensino superior no Brasil, nos ��ltimos anos, a utiliza����o deste recurso pol��tico de equaliza����o das desigualdades sociais. Este estudo mostra um diagn��stico do perfil da produ����o acad��mica e permite identificar as ��reas de estudo e os temas mais frequentemente associados ��s AAs. Pretende-se com ele, contribuir com um marco te��rico-conceitual para que novas pesquisas possam ser realizadas de modo a enriquecer o campo de estudos das ci��ncias sociais, em especial sobre o tema AAs

Estudo toxicol��gico de extratos do coral alcion��ceo Chromonephthea braziliensis (Alcyonacea, Nephtheidae)

Os recifes de corais s��o ecossistemas diversos com alta densidade de biodiversidade, o que leva a intensa competi����o entre as esp��cies. Estas esp��cies podem produzir subst��ncias desconhecidas, muitas com valor farmacol��gico. Chromonephthea braziliensis �� um coral mole invasor, origin��rio do Oceano Indo-Pac��fico, que foi possivelmente transportado por plataformas de petr��leo e cuja presen��a �� uma amea��a para a biodiversidade da regi��o de Arraial do Cabo (RJ). Esta esp��cie produz metab��litos secund��rios que s��o respons��veis pela indu����o de danos para o ecossistema local. A finalidade deste estudo �� a busca de novas subst��ncias para quimioterapia geral com base na estrutura de compostos bioativos. Extratos desse coral foram preparados a partir de col��nias liofilizadas (solventes: hexano, diclorometano, acetato de etila e metanol). Realizaram-se an��lises qu��micas para a caracteriza����o dos extratos e avaliaram-se as atividades: mutag��nicas e citot��xicas, usando o ensaio de muta����o reversa bacteriana (Salmonella/microssoma) com as linhagens TA97, TA98, TA100 e TA102; genot��xicas, utilizando an��lise da quebra do DNA e forma����o de micron��cleos na linhagem RAW 264,7 de macr��fagos e; t��xicas para n��uplios de microcrust��ceos Artemia salina. Observou-se citotoxicidade, na presen��a de S9 mix, dos extratos diclorometano para a linhagem TA102 na concentra����o de 20 g/100 L/placa e metanol para a TA97 com 5 e 20 g/100 L/placa. Os extratos diclorometano, acetato de etila e metanol apresentaram genotoxicidade no DNA plasmidial em concentra����es elevadas (250 g/mL), mas nenhum dano ao DNA foi observado no ensaio de micron��cleo. Todos os extratos foram t��xicos para os n��uplios de microcrust��ceos em pelo menos uma das concentra����es usadas (0,01 1000 g/mL), e a LC50 pode ser determinada apenas para os extratos hexano, diclorometano e acetato de etila.

Avalia����o microbiol��gica, detec����o e susceptibilidade a antimicrobianos de potenciais enteropat��genos das fam��lias Enterobacteriaceae e Vibrionaceae em mexilh��es Perna perna da praia de Itaipu, Niter��i-RJ

Por serem organismos filtradores, os mexilh��es devem ser extra��dos para consumo somente de ��guas com padr��es microbiol��gicos regulamentados pelo Conselho Nacional do Meio Ambiente, uma vez que intoxica����es alimentares de origem bacteriana s��o as consequ��ncias mais comuns relacionadas ao consumo destes moluscos. Ap��s a retirada dos cost��es, estes organismos passam por processos de fervura, lavagem, acondicionamento em sacos pl��sticos e transporte at�� a chegada ao mercado onde s��o comercializados; etapas estas, realizadas sem cuidados ass��pticos. Objetivando avaliar a qualidade microbiol��gica de mexilh��es Perna perna coletados na praia de Itaipu, Niter��i, RJ; ap��s a sua fervura; e comercializados no Mercado S��o Pedro, foram realizadas contagens de coliformes totais e termotolerantes e pesquisa de Escherichia coli, Salmonella spp. e Vibrio spp. por metodologia convencional e molecular em amostras obtidas destes locais. Pelo teste de disco-difus��o foi observado o perfil de resist��ncia das cepas isoladas. Do total de amostras analisadas (27) apenas 3 dos mexilh��es que sofreram processo de aferventa����o, 1 do comercializado e 3 do in natura, se encontravam dentro dos padr��es aceit��veis pela legisla����o. N��o houve diferen��a significativa entre as contagens de coliformes termotolerantes dos diferentes mexilh��es analisados, mas sim entre os per��odos seco e chuvoso. Somente uma das nove coletas de ��gua mostrou-se pr��pria para o cultivo de mexilh��es (at�� 14 CF/mL). Foram isoladas e caracterizadas fisiol��gicamente, 77 estirpes da esp��cie E. coli, sendo confirmadas molecularmente por PCR os sorotipos EPEC, STEC e EAEC; 4 cepas Salmonella spp. sendo apenas uma confirmada por PCR; e das 57 cepas caracterizadas como Vibrio spp., 51 foram confirmadas por PCR, sendo 46 Vibrio spp., 2 V. cholerae, 1 V. vulnificus, 1 V. parahaemolyticus e 1 V. mimicus. Entre as estirpes de E. coli, 13% apresentaram multirresist��ncia e 15,6% apresentaram resist��ncia m��ltipla. A estirpe de Salmonella spp. se mostrou sens��vel a todos os antimicrobiados testados. Das estirpes de Vibrio spp. testadas, 68,6% apresentaram multirresist��ncia e 72,5% apresentaram resist��ncia m��ltipla. A partir da pesquisa de genes direto do caldo de enriquecimento foi poss��vel detectar todos os genes pesquisados, com exce����o para os sorotipos de Salmonella e V. cholerae. Baseado nos resultados do presente trabalho pode-se inferir que os mexilh��es, amplamente comercializados no munic��pio de Itaip��, podem se constituir em risco para a sa��de p��blica dos consumidores no Rio de Janeiro, necessitando dos ��rg��os competentes uma eficiente fiscaliza����o nos pontos de venda e cultivo destes moluscos.

Avalia����o do potencial fotoprotetor de extratos de musgos e investiga����o de seus riscos toxicol��gicos

A radia����o ultravioleta (UV) induz diversos efeitos nocivos nos organismos e a quantidade desta radia����o que atinge a biosfera �� afetada pela concentra����o de oz��nio, latitude, altitude, clima e reflex��o especular. As respostas de bri��fitas em rela����o aos efeitos da radia����o UV e a presen��a de compostos que absorvem esta radia����o t��m sido estudadas. Sanionia uncinata, Holomitriopsis laevifolia e Leucobryum laevifolium s��o esp��cies de musgos encontrados em locais expostos a alta incid��ncia de radia����o UV e com habitats distintos. Considerando que as respostas de musgos contra os efeitos da radia����o UV e seus mecanismos de prote����o ainda s��o pouco caracterizados, o objetivo deste estudo foi investigar o potencial fotoprotetor e poss��veis riscos toxicol��gicos associados aos extratos dos musgos S. uncinata, proveniente da Ant��rtica e H. laevifolia e L. laevifolium, proveniente do Amazonas. Seus extratos metan��lico (EM), aquoso (EA), hidroalco��lico (EH) e etan��lico (EE) foram estudados com a caracteriza����o qu��mica por absor����o ao UV e vis��vel e pela cromatografia l��quida de alta efici��ncia; quantifica����o do ��ndice total de compostos fen��licos; determina����o da capacidade captadora do radical 2,2-difenil-1-picril-hidrazila a fim de avaliar as atividades antioxidantes; avalia����o do potencial de fotoprote����o cut��nea pela determina����o do fator de prote����o solar; avalia����es do potencial mutag��nico e citotot��xico, atrav��s do ensaio de Salmonella/microssoma, utilizando as cepas TA97, TA98, TA100, TA102 e TA104; do potencial fotomutag��nico atrav��s do ensaio de fotomutagenicidade, usando as cepas TA102 e TA104; e investiga����o dos efeitos genot��xicos e fotogenot��xicos, pelo ensaio de micron��cleo e fotomicron��cleo, respectivamente, usando diferentes linhagens celulares estabelecidas. Foram encontradas atividades fotoprotetoras e antioxidantes e observou-se que os extratos se apresentaram singulares devido a sua composi����o qu��mica. Os resultados fotoprotetores, al��m dos mutag��nicos/fotomutag��nicos, genot��xicos/fotogenot��xicos e suas respectivas avalia����es citot��xicas tamb��m permitiram selecionar extratos e suas concentra����es, como promissores candidatos em fotoprote����o Assim, os EA e EH de H. laevifolia e L. laevifolium apresentam, no geral, os resultados mais significativos, tornando-se potenciais para avalia����es refinadas em fotoprote����o e na separa����o de componentes que possam levar a futuras aplica����es como antioxidantes e protetores solares ou como adjuvantes.

Avalia����o citot��xica, mutag��nica e genot��xica dos an��logos do Megazol

A doen��a de Chagas �� uma doen��a tropical infecciosa e negligenciada respons��vel por um grande n��mero de pessoas infectadas e em risco de infec����o, principalmente nas regi��es pobres da Am��rica Latina. No momento, apenas duas drogas, Benzonidazol e Nifurtimox, est��o dispon��veis para o tratamento da doen��a de Chagas, mas s��o ineficazes por apresentarem baixa taxa de cura. O Megazol �� um importante representante da classe dos nitroimidaz��is e �� uma alternativa promissora devido ao seu potencial tripanocida com um perfil superior de a����o quando comparado ao tratamento dispon��vel. No entanto, o Megazol n��o �� utilizado clinicamente uma vez que possui atividade mutag��nica e carcinog��nica relatada. O Instituto de Tecnologia em F��rmacos (Farmanguinhos) desenvolveu tr��s an��logos do Megazol: PTAL 05-02 (3-amino-5-(1-metil-5-nitro-1H-imidazol-2-il)-1H-1,2,4-triazol), PAMT 09 (2-amino-N-(1-metil-4-nitro-1H-imidazol-5-il)-5-(trifluorometil)-1H-1,2,4-triazol) e PTAL 04-09 (1-(1-metil-4-nitro-1H-imidazol-5-il)-1H-pirazol). O objetivo deste trabalho �� apresentar novas mol��culas an��logas do Megazol com atividade tripanocida, desenvolvidas a partir de estrat��gias racionais de desenvolvimento de subst��ncias bioativas ao manter o perfil farmacodin��mico do Megazol enquanto tenta diminuir ou remover o efeito genot��xico. Testes genot��xicos na avalia����o segura de novas subst��ncias bioativas foram utilizados, de acordo com as diretrizes da OECD. O teste da Salmonella/microssoma foi utilizado na avalia����o mutag��nica e citot��xica, utilizando linhagens de Salmonella enterica sorovar Typhimurium, deficientes e supercompetentes na s��ntese de enzimas nitroredutase e acetiltransferase. O an��logo PAMT 09 n��o foi mutag��nico em nenhuma concentra����o e linhagem utilizada. Os an��logos PTAL 05-02 e PTAL 04-09 foram mutag��nicos, na aus��ncia de S9 mix, para a linhagem TA98/1,8-DNP6. Na avalia����o de citotoxicidade, os tr��s an��logos foram citot��xicos, independente de metaboliza����o ex��gena S9 mix. O teste do micron��cleo, utilizando c��lulas de macr��fago de rato, foi realizado para a avalia����o genot��xica dos an��logos do Megazol. Os tr��s an��logos foram capazes de induzir a forma����o de micron��cleos e apresentaram efeito citot��xico.

Caderno de revis��o da aprendizagem de l��nguas estrangeiras (SME-RJ): uma an��lise lingu��stico-discursiva

A presente disserta����o situa-se no ��mbito dos estudos da linguagem e do mundo do trabalho do professor. Visa contribuir para o enriquecimento do debates sobre de pol��ticas p��blicas referentes ao ensino de l��nguas estrangeiras (LEs) adotadas pela Secretaria Municipal de Educa����o do Rio de Janeiro (SME_RJ). Teve como objetivo, a partir de um olhar ling����stico-discursivo, analisar um conjunto de exerc��cios destinado �� revis��o da aprendizagem de LEs ingl��s, franc��s e espanhol no 6 ano do ensino fundamental intitulado Caderno do Aluno Material de Revis��o, quando os alunos iniciam a aprendizagem de uma dessas l��nguas.. Esse material foi utilizado em todas as escolas da mencionada rede p��blica de ensino nos 45 dias inicias do ano letivo de 2009, momento dedicado �� revis��o dos conte��dos. A orienta����o te��rica seguida considera as no����es de dialogismo e g��nero do discurso (BAKHTIN, 1992). Entre nossas conclus��es, observa-se que apesar da nova organiza����o da sociedade e dos avan��os das pol��ticas p��blicas direcionadas �� Educa����o, verifica-se um retrocesso na concep����o institucional do trabalho educativo, tendo em vista a falta de autonomia destinada aos professores para exercerem sua pr��tica de trabalho em sala de aula